第三代试管D3活检，是指在卵裂球阶段进行的活检，即将受精卵发育到6-8个细胞时，提取1-2个细胞进行卵裂胚胎活检，通常称为D3活检。卵裂球阶段的胚胎经历了配子基因组激活、与胚胎极性相关蛋白的表达、致密性的发生、粘附分子的表达以及细胞间信号沟通的建立等生理过程。尽管在卵裂球阶段进行活检可能存在一定的潜在风险，如导致遗传变异影响后代表观，但第三天活检(D3)仍然具有一定的临床意义。可能对活检的不良影响包括卵巢功能异常、表观遗传修饰异常、神经退行性病变、胚胎发育时间的延长、胚胎种植率低以及妊娠过程中母体和胎儿类固醇代谢异常。

     基于基于timelapse技术的研究表明，卵裂球期胚胎活检会对胚胎的后续发育和囊胚形成产生延迟的影响。此外，活检的时间点也会影响胚胎的着床能力。

     研究结果显示，与未进行活检的胚胎相比，经过卵裂球活检的胚胎着床能力下降了39%；然而，在囊胚活检的研究中，胚胎着床能力在TE活检组与未活检组之间的差异较小。